Pipety se běžně používají v laboratořích k přenosu mililitrových objemů kapalin, od minimálně 1 ml do maximálně 50 ml. Brčka mohou být jednorázová ve sterilním plastu nebo opakovaně použitelná v autoklávovatelném skle. Obě pipety používají pipetu k nasávání a vytlačování kapalin. V různých experimentech se stejnou pipetou se používají různé velikosti pipet. Pipety jsou například důležité pro míchání chemických roztoků nebo buněčných suspenzí, přenos kapalin mezi různými nádobami nebo nanášení činidel na různé hustoty. Pokud je věnována pečlivá pozornost objemu nasáté a vypuzené kapaliny, mohou být pipety užitečným nástrojem v laboratoři pro přesný přenos mililitrových objemů kapaliny.
Typy pipet a základní součásti pipet
Pipety jsou obvykle sterilní plastové zkumavky na jedno použití; mohou to být také autoklávovatelné, opakovaně použitelné skleněné zkumavky.
Všechny pipety používají při pipetování pipetu.
Pipeta eliminuje potřebu výzkumníků pipetovat ústy jako dříve. Tato primitivní metoda pipetování se nedoporučuje, protože má potenciál způsobit vážné následky pro tekutiny nasávané do úst.
Kulička pipety je druh pipety s nejhorší přesností. Obvykle se spáruje se skleněnou pipetou pro přenos proměnlivého množství kapaliny.
Pipetovací pumpy jsou vhodné i pro skleněné pipety, které mohou přenášet přesnější objemy kapalin. Pipetové pumpy jsou obecně vhodné pro opakované dávkování stejného objemu kapaliny.
Pomocné pipety jsou nejběžnější pipety. Skládá se z několika hlavních částí: náustek je místo, kam se vkládá pipeta a kde je umístěna filtrační membrána, která chrání vnitřek pomocné pipety před kontaminací kapaliny.
Na rukojeti pomocné pipety jsou vidět dvě tlačítka. Stisknutím horního tlačítka se kapalina nasaje a stisknutím spodního tlačítka se kapalina vypustí.
Většina pomocných pipet má také ovládací knoflík pro rychlost vypouštění kapaliny. Například může být nastaven na uvolňování kapaliny pod tlakem nebo může být nastaven na gravitační uvolňování bez vnější síly.
Zatímco některé pomocné pipety jsou dodávány s napájecím kabelem, většina je napájena baterií.
Některé pomocné pipety se dodávají se stojánkem, který se vejde do oblasti rukojeti, což umožňuje umístit pomocnou pipetu na bok, když se nepoužívá, aniž by bylo nutné pipetu vyjmout.
Jak již bylo zmíněno dříve, stejná pipeta může používat různé velikosti pipet v závislosti na objemu, který má být pipetován, od pouhých 0,1 mililitrů až po desítky mililitrů.
Základní obsluha pipet
Nejprve vyberte správnou velikost pipety podle objemu kapaliny, kterou chcete přenést. Poté otevřete obal shora, dotkněte se pouze části nad značkou zaškrtnutí, vložte ji do špičky pipety a vyjměte zbývající obal.
Poté jednou rukou uchopte pipetu a otevřete víko nádoby obsahující kapalinu, kterou chcete nasát. Pipetu držte ve svislé poloze a jemně stiskněte horní tlačítko, aby se vzorek pomalu nasál.
K měření objemu kapaliny, kterou chcete přenést, použijte odměrnou rysku na stěně pipety. Všimněte si, že objem by měl být odečítán ve spodní části menisku, nikoli nahoře.
Poté opatrně vypusťte kapalinu do nádoby dle vašeho výběru a dávejte pozor, aby se špička pipety nedotkla žádného nesterilního povrchu.
Při vytlačování kapaliny používejte opatrně a jemnou silou, zvláště při použití pipet s malou objemovou kapacitou, aby nedošlo ke kontaminaci pomocného pipetového filtru a vzorku nebo poškození pomocné pipety. Špatné zacházení při použití pomocné pipety může obtěžovat další zkušenější lidi v laboratoři, kteří možná budou muset pipetu kvůli opravě rozebrat. Při čerpání velkého množství kapaliny nebo vypouštění kapaliny lze rychlost přenosu kapaliny zvýšit silným stisknutím tlačítka.
Nakonec nezapomeňte brčko po přenesení tekutiny řádně zlikvidovat.
Aplikace
Nyní, když víte, jak pracovat s pipetou, podívejme se podrobněji na některé běžné laboratorní aplikace.
Důležitým krokem při kultivaci a nanášení buněk je rovnoměrná distribuce buněk v konečném roztoku. Buněčné suspenze lze jemně a efektivně míchat pomocí pipety, která současně míchá chemické roztoky a činidla.
Po izolaci nebo zpracování experimentálních buněk lze pipety použít k přenosu klonů celých buněk pro expanzi nebo následnou experimentální analýzu.
Čas odeslání: 31. srpna 2022